皮下注入空气联合LPS诱导皮下气囊慢性炎症模型

背景

气囊模型是研究炎症的常用模型，也常作为一种对骨科生物材料较敏感的体内模型，用来检验磨损微粒刺激引起的细胞和炎症因子反应。以往制作气囊慢性炎症所采用的方法有在气囊里包埋棉花、小鼠软骨或注射细胞碎片等，虽能达到慢性炎症的效果，但此类模型有致炎因子复杂，操作难度较大，容易引起继发细菌感染等弊端。通过在气囊里注入脂多糖或卡介苗的方法可以较好克服这些弊端，能较好地模拟在单一致炎因子存在的情况下引起的慢性炎症状态。与关节慢性炎症相比，气囊的注药容量大，不仅可以对炎症分泌物进行生化分析，还可以对炎症组织中细胞、血管生成情况进行相关分析等同，且不影响小鼠正常活动。

材料和方法

C57BL/6小鼠（雄性，25-30 g）

造模方法：皮下注入空气后于第 7 天向两侧气囊中分别注入LPS，1 周后补注液体 1 次成功制备皮下气囊慢性炎症模型。

评价指标：HE染色 

异硫氰酸荧光素（FITC）诱导特应性皮炎模型

背景

FITC能在小鼠体内诱发以Th2 偏移为主的变应性反应，相关对比实验通过FITC 或 DNFB 诱导的变应性皮炎模型发现 BALB/c 小鼠比 C57/B6能引发更显著的 Th2或 Th1反应。在此类迟发型变态反应中，出现明显的淋巴细胞浸润和嗜酸性粒细胞、中性白细胞和巨噬细胞的聚集，但肥大细胞和 IgE 的变化却不明显，此模型可用于检测作用于 Th2细胞而发挥抗炎作用的药物。

材料和方法

Balb/c小鼠（雌性，6周龄）

造模方法：第0、1、2天在腹部涂抹异硫氰酸荧光素（FITC）；第7天，用 FITC溶液对小鼠右耳进行攻击。每周重复一次耳部再激发，持续4周，成功制备特应性皮炎模型。

评价指标：大体观察、耳重测定、ELISA及生化检测、HE染色

恶唑酮诱导特应性皮炎模型

背景

恶唑酮是一种半抗原，它有很强的穿透能力，可以破坏皮肤屏障进入皮肤内并与内源性蛋白质相关联，从而产生免疫原性半抗原复合物, 诱发免疫学应答。相较于卵清蛋白、 粉尘螨等抗原刺激诱导 AD 样小鼠模型，该模型在停止 4 d 刺激后仍可作为AD小鼠模型进行相关研究。

材料和方法

Balb/c小鼠（雌性，6周龄）

造模方法：背部脱毛， 每天在脱毛区内外用 恶唑酮使其致敏，连续 3 d； 之后用 恶唑酮涂抹在相同部位，每4 d 一次，连续 4次成功制备特应性皮炎模型。 阳性药物：丁酸氢化可的松乳膏

评价指标：大体观察、皮肤组织HE染色、血清ELISA检测 

鼠源胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）诱导特应性皮炎模型

背景

TSLP在特应性皮炎（atopic dermatitis，AD）发展中起着一个重要的致病因素，在急性和慢性AD病人皮肤病变处的角质形成细胞中大量表达TSLP，然而在健康人和AD患者的非病变皮肤中却没有发现TSLP。进一步研究发现过敏性炎症是TSLP通过刺激、活化和移动朗格汉斯细胞至皮肤引流淋巴结启动的免疫反应的。同时在AD患者的破损皮肤中，检测到细胞因子IL-1β、IL-13、IL-4和TNFa也会高表达，这些细胞因子的表达又可以诱导TSLP的产生。 TSLP在AD中的失调可能与Notch信号缺失具有重要关系。在动物模型中，上皮角化细胞中Notch的缺失可以破坏皮肤屏障的完整性，并且产生类似于创伤的微环境，高表达的TSLP 介导Th2型炎症免疫，使小鼠患有与AD病人相似的皮肤病。此外，小鼠角化细胞中特异性类固醇受体RXRa和RXRβ缺失，也可以通过TSLP使小鼠患有AD相似的皮肤病。

材料和方法

Balb/c小鼠（雌性，6周龄）

造模方法：在第0、2、4和7天，右耳皮下注射TSLP，末次注射6 h后成功制备特应性皮炎模型。

评价指标：大体观察及耳重测定、ELISA检测、HE染色

Derf联合SEB诱导特应性皮炎模型

背景

1、模型的定义：特应性皮炎 (Atopic Dermatitis， AD) 是一种慢性或慢性复发性瘙痒性炎症性皮肤病，这种由T细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞及其他细胞感染的皮肤病变关联，暗示其潜在的复杂免疫功能障碍有关。屋尘螨蛋白Derf和葡萄球菌类毒素SEB反复作用于皮肤，诱导AD样皮肤病变。屋尘螨衍生的丝氨酸蛋白酶对角质形成细胞的PAR-2的激活诱导产生ET-1（是由各种类型的细胞包括内皮细胞，血管平滑肌细胞，角质形成细胞和炎性细胞合成的多肽），有助于诱导特应性皮炎中瘙痒的产生； SEB则可在皮肤上引起炎症反应，达到维持和加剧皮肤炎症的目的。 2、模型应用方向：皮肤科相关课题。 3、实验动物（品系、周龄、性别）：小鼠品系： C57BL/6、BALB、cNC/Nga；周龄：6-8周；性别不限。 4、造模方法简介：麻醉后，背部涂抹脱毛膏，刮去脱毛膏及毛发，形成3cm²左右脱毛区域，并在除毛后的皮肤上轻刮造成皮损。生理盐水清洗背部并消毒。将Derf及SEB滴于化妆棉上，用胶布将化妆棉固定于小鼠脱毛区域，并使用胶布将其缠在小鼠腰腹位置。第4天，将敷药装置解除，休息1-2天后再重复给药一次；第9天，解除第二次给药的装置。前两次给药为第一轮给药，第9天后再进行第二轮共两次给药。步骤同前。于第一次给药后24天进行观察及评分。 5、模型验证：第24天进行评分，对背部造模区域的四个参数：发红，出血，喷发和脱屑进行评价，评级按以下严重性等级： 0-无症状， 1-轻度， 2-中级， 3-严重。 6、参考文献：Huang Ke, et al. Glucocorticoid insensitivity by staphylococcal enterotoxin B n keratinocytes of allergic dermatitis is associated with impaired nuclear translocation of the Glucocorticoi id Receptor a.[J] J Dermatol Sci, 2018, 92: 272-280. (1F=3.687) 7、其他验证：如离体皮肤HE染色病理学检测等。

材料和方法

C57BL/6 小鼠（雌雄各半，6-8周龄左右)

造模方法：将带有Derf和SEB的化妆棉固定在背部脱毛区，几天后解除并休息一段时间。反复3轮后成功制备特应性皮炎模型。

阳性药物：不注明

评价指标：表观评分、ELISA检测、HE染色、甲苯胺蓝染色 

卡泊三醇诱导特应性皮炎模型

背景

近年来，有研究表明，局部应用MC903能引起小鼠特应性皮炎综合征，同时MC903能够通过上皮角质形成细胞维生素D受体（VDR）引起胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）的高表达。TSLP是一种上皮细胞来源的细胞因子，在起始和促进Th2细胞介导的过敏性炎症中起关键作用DBB。因此，基于TSLP研究特应性皮炎具有重要的意义。

材料和方法

Balb/c小鼠（雄性，6-8周龄左右，体重18-20 g）

造模方法：颈背部和耳部涂抹卡泊三醇工作液，1次/天，14天后成功制备特应性皮炎模型。

评价指标：耳背部皮炎评分、肥大细胞计数、HE染色  

DNFB诱导特应性皮炎模型

背景

变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis， ACD)为T细胞介导的迟发型变态反应。变应原进入机体后由抗原呈递细胞(antigen presenting cell，APC) 如皮肤朗格汉斯细胞(1angerhans cell，LC)或粘膜巨 噬细胞、树突状细胞将抗原呈递给T细胞，才能致敏机体，引发变态反应。

材料和方法

SD大鼠（雌雄各半，6-8周龄）

造模方法：背部致敏后在双耳激发，21天后成功制备特应性皮炎模型。

阳性药物：醋酸地塞米松乳膏

评价指标：大体观察、耳部重量及厚度测定、HE染色